細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗的準(zhǔn)備和反應(yīng)步驟
點擊次數(shù)：964次 更新時間：2020-09-17
細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒的準(zhǔn)備：
1、使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫，試劑不能直接在37oC溶解。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，依次倍比稀釋成不同的梯度，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3、濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。
細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒反應(yīng)步驟：
?。?）嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
?。?）加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
?。?）封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
（4）用洗板機(jī)洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
（5）合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
?。?）加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
?。?）顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
?。?）加樣時保持顯色劑不外流；A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
?。?）應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔，整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至低限度。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
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